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更新日期2025-07-23 11:42
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微分干涉顯微鏡是一種特殊的光學顯微鏡技術,用于增強透明樣品(如活細胞、無色細胞和細胞組織)的對比度,而無需使用染色或其他化學處理。微分干涉顯微鏡廣泛應用于生物學和醫學研究,特別是在活細胞成像和細胞生物學中,能夠清晰地觀察到細微結構和細胞內的動態變化。
工作原理
微分干涉顯微鏡基于干涉現象原理,通過分離入射光并使其通過樣本中的不同部分,從而產生干涉信號,增強對比度。與常規明場顯微鏡不同,微分干涉顯微鏡使用兩個偏振光的光束,它們會在通過樣本時相遇并相互干涉,產生具有高度對比的圖像。
具體過程:
1.偏振光源:光源發出的光首先通過偏振片,被轉換成偏振光。
2.分束:光通過分束器(又稱為Nomarski干涉板),被分成兩束偏振光。
3.樣本照明:這兩束偏振光分別通過樣本的不同路徑。由于樣本不同部分的折射率不同,這兩束光在通過樣本時會發生相位變化。
4.干涉:兩束光在通過樣本后,經過另一分束器重新匯聚。由于它們的相位不同,會發生干涉,從而產生強烈的對比效應。最終形成一個具有高對比度的圖像,能夠顯示細胞的內部結構和其他細微特征。
微分干涉顯微鏡特點與優勢
1.高對比度:微分干涉顯微鏡能夠顯著提高透明樣本的對比度,尤其是對于未染色的細胞或組織。通過對折射率差異的敏感反應,可以觀察到一些細微的結構,通常是常規明場顯微鏡無法提供的細節。
2.無染色要求:與其他顯微技術(如熒光顯微鏡或染色顯微鏡)不同,微分干涉顯微鏡不需要用染料或化學試劑處理樣本。它能夠清晰顯示透明或未染色的樣本,這對于活細胞觀察尤其重要,因為染色可能會影響細胞狀態。
3.活細胞成像:微分干涉顯微鏡非常適合進行活細胞成像,因為它不會影響樣本的生物學功能。通過這種顯微鏡技術,可以觀察到活細胞的動態變化,如細胞分裂、細胞運動等過程。
4.高分辨率:微分干涉顯微鏡可以提供比明場顯微鏡更高的分辨率,特別是在細胞和細胞內結構的觀察中。
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